(1)严格照麦克奥迪MOTIC 荧光显微镜AE31E BA410E操作说明进行操作,不要随意更改。
(2〕观察对象必须是可自发荧光或己被荧光染料染色的标本。
(3)应在暗室中进行检查进入暗室后,接上电源,点燃超高压汞灯5一15min,待光源发出强光稳定后,眼睛完全适应暗室,再开始观察标本。
(4)载玻片、盖玻片及镜油应不含自发荧光杂质,载玻片的厚度应在0.8~1.2MM之间,太厚可吸收较多的光,并且不能使激发光在标本平面上聚焦。载玻片必须光洁,厚度均匀,无油渍或划痕。盖玻片厚度应在0.17mm。
(5)防止紫外线对眼睛的损害,在调整光源时应安装上防护板。7)检查时间每次以0.2h为宜,超过90分钟,超高压汞灯发光强度逐渐下降,荧光减弱;标本受紫外线照射3一5分钟后,荧光也明显减弱,所以,最多不得超过2一3小时。
(8)荧光标本一般不能长久保存,若持续长时间照射(尤其是紫外线)易很快褪色。因此,如有条件则应先照相存档,再仔细观察标本:
(9)荧光显微镜光源寿命有限,启动高压汞灯后,不得在巧内将其关闭,一经关闭,必须待汞灯冷却后方可再开启。严禁频繁开闭,否则,会大大降低汞灯的寿命标木应集中检查,以节省时保护光源。大热时,应加电扇散热降温,新换灯泡应从开始京lt记录使用时间。灯熄火后欲再用时,须待灯泡充分;令却后才能点燃。一天中应避免数次点。10)标本染色后立叩观察,因时间久了荧光会逐渐减弱。若将标本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存,可延缓荧光减弱时间,防止封裱剂蒸发。
11〕较长时间观察荧光标本时,一定要戴能阻挡紫外光的护目镜,加强对眼睛的保护。在未加入阻断滤光片前不用眼直接观察,会损伤眼睛:
12)激发光长时间的照射,会发生荧光的衰减和淬灭现象,因此尽可能缩短观察时间,暂时不观察时,应用挡板遮盖激发光。
(13)作油镜观察时,应用“无荧光油”。
14)荧光都较弱,应在较暗的室内进行。