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【多图】麦克奥迪倒置显微镜操作使用步骤详细说明

发布日期:2022-4-18 16:28:01 点击次数:0

我们以麦克奥迪倒置生物显微镜AE2000型号及倒置荧光显微镜AE31来举例,告知您如何一步步正确操作,来使用显微镜

首先,请打开麦克奥迪倒置显微镜

将显微镜插入电源 (1)。将其打开(2)并逐渐将光强度增加到所需水平(显微镜右侧的黑色旋钮)(3)。


瞳距调整
将样品放在载物台板上(4),然后通过手动旋转物镜转换器(5) 在 10X 物镜中摆动。
将聚光器滑块推到中间位置(6);在标准配置中,此位置不包含用于相衬的照明环。


首先使用位于显微镜(7)两侧的粗调焦旋钮对样品进行对焦。然后通过在“蝴蝶”模式下移动单独的目镜管来调整瞳距(8)。最后,左右图像应该加入并成为一个圆形图像。此设置将允许用户在放松模式下用双眼观察样本。


屈光度调整
屈光度调节可补偿左眼和右眼之间的任何视力差异。首先确保两个目镜都在 +/- 零屈光度位置(9)。仅用右眼通过右目镜观察(10)。


使用精细聚焦旋钮(11) 精确聚焦图像▼


然后只用左眼通过左目镜观察(12)。现在只使用左目镜的屈光度调整来聚焦样品。请勿使用粗调/细调焦旋钮进行此最终调整。

显微镜现在可以根据用户的眼睛进行完美的双目观察,提供标本的准确可视化。


倒置显微镜 AE31E 和 AE2000 的明场设置

聚光镜是显微镜的重要组成部分,可确保均匀和高质量的照明以获得最佳图像效果。要正确设置聚光镜,请确保 10X 物镜在光路中。将样品放在平台板上并通过粗/细焦点(13) 聚焦样品。请注意,在倒置显微镜中,物镜(分别是物镜转换器)在z 方向移动以找到焦点水平。一旦图像清晰可见,这个焦点水平就是任何进一步调整的参考。严格保持这个位置。

现在将视场光阑(内置于照明臂)关闭 1/3 (14)▼



使用聚光镜托架(15)左侧的聚光镜聚焦旋钮将聚光镜移动到 z 位置。根据使用的聚光镜,将其移至照明臂(16)左侧的 LWD 或 ELWD 位置标记。通过目镜观察:样本图像内的照明点应具有清晰的边界。如果没有,通过再次将聚光镜托架移动到 z 位置(17) 进行轻微校正。


聚光镜托架(18)前侧的那 2 个对角螺钉有助于将光点居中▼


移动它们,直到光点位于图像的中间(19),打开视场光阑,直到整个视场都被照亮 (20)。


最后我们必须使用光圈来调整图像对比度。使用冷凝器主体前侧的水平仪。水平移动它,直到图像显示出良好的对比度和最大的信息(21)▼

孔径光阑负责照明角度,即照明的数值孔径(NA)。为获得最大分辨率,照明的NA 应与所用物镜的 NA 具有相同的值。与麦克奥迪正置生物显微镜一样,我们使用具有长工作距离的聚光镜,这样的设置是不可能的。请自由关闭光圈,直到图像对比度令人满意(22)。 关闭孔径光阑会降低分辨率和亮度,但会增加样本视图上的对比度和焦深。

在大多数情况下,通过将孔径光阑关闭到 2/3,可以获得具有适当对比度的图像。

*对于麦克奥迪倒置生物显微镜 AE2000 型号,请跳过第 14 至 22 步,直接进入相衬设置章节▼

在 AE2000 倒置生物显微镜上,聚光器位于中央,这些步骤不是必需的(图 1)。


麦克奥迪倒置显微镜 AE31E 和 AE2000 的相差设置

相衬是一种图像观察对比方法,可以使涂片、细胞培养物和其他未染色标本等样品可视化。
在麦克奥迪倒置显微镜中,大多数培养皿和孔板都用作样品载体。冷凝器的长工作距离为使用各种容器提供了足够的空间。
对于相衬,必须使用特别设计的物镜。他们的光学设计显示了一个半透明的环,在物镜内的特定镜头上真空金属化。该环对应于放置在冷凝器滑块中的合适的环形环。一旦两个环都对齐到叠加,相衬就可以工作了。

所有相差物镜都可以通过其绿色标签(国际标准)来识别(23)。


代号Ph0、Ph1等是指环的物理尺寸。所有相位物镜也可以在明场中使用(有轻微限制)。

从相衬开始,首先确保设置了正确的明场。更改为相衬时保持正确的明场设置。完全打开聚光镜的孔径光阑(24)。选择您喜欢使用的物镜,并通过分别推动聚光器滑块(25) 将环形照明环带入光路。


在 倒置显微镜 AE31E 和 AE2000中,Ph1 环覆盖相位物镜 10X/20X/40X,而 PhO 以及相应的物镜 4X 是可选的。
现在从目镜筒中取出一个目镜。如果在将目镜拉出时旋转目镜,则此方法效果最佳。改为插入相位定心望远镜 (CT) (26)。松开定心望远镜(27)上的固定螺钉。通过拉出 CT 的内部,您将专注于相差物镜(28) 内的暗环。
注意:这个聚焦过程必须通过移动定心望远镜的内部来完成。请不要触摸粗/细调焦旋钮▼


在聚焦暗环的同时,您还将实现照明环的图像,该图像被投影到同一平面(29)。如果物镜相位环(暗)(30)和照明环(亮)(31)不重叠,请使用麦克奥迪显微镜包装箱内随附的两个内六角扳手。将钥匙插入相位滑块(32) 边缘的埋头螺钉中。转动按键移动滑块中的照明环,直到照明环的图像与暗相位环(33) 重叠。


由于 Ph1 环尺寸适合 10X/20X/40X 物镜,因此对这些物镜进行了校准。在 4X 物镜的情况下,必须使用 Ph0 环相应地对齐适当的环。拉出定心望远镜(34),通过旋转运动推入目镜(35)。如果照明环的图像从物镜中的相位板发散,则会产生类似于倾

斜照明的低相位对比度图像。


要将相位环插入或更换到相位滑块中,请注意相位环的方向是否正确(阅读顶部)。将其边缘推向柔性灯丝,直至其装入孔(36)▼


如有必要,使用内六角扳手将环带移至孔(37) 的中心。稍后将通过上述过程进行微调;请使用 4X 物镜和 Ph0 环重复第(23)到(35)点的步骤。
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